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問答題說明多肽氨基酸序列自動(dòng)分析法的基本原理。根據(jù)此原理，試設(shè)計(jì)一臺(tái)多肽氨基酸序列自動(dòng)分析儀。

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1.問答題有一個(gè)七肽，經(jīng)分析其氨基酸組成為L(zhǎng)ys，Pro，Arg，Phe，Ala，Tyr和Ser。此肽與DNFB不反應(yīng)。用胰凝乳蛋白酶降解，得到兩個(gè)肽段，其氨基酸組成分別為Ala，Tyr，Ser和Pro，Phe，Lys，Arg。這兩個(gè)肽段與DNFB反應(yīng)，分別生成DNP-Ser和DNP一Lys。此肽與胰蛋白酶作用，同樣生成兩個(gè)肽段，它們的氨基酸組成分別為Arg，Pro和Phe，Tyr，Lys，Ser，Ala。試推測(cè)此多肽的結(jié)構(gòu)和氨基酸序列。

參考答案：

2.問答題-種多肽經(jīng)酸水解后分析得知由Lys，Asp，His，Glu，Ala，Val，Tyr以及兩個(gè)NII3組成。當(dāng)用DNFB處理后，得到DNP- Asp；用羧肽酶處理可得到游離的Val。此多肽用胰蛋白酶降解時(shí)，得到兩個(gè)肽段，其中一個(gè)（含Lys，Asp，Glu，Ala，Tyr）在pH=6.4時(shí)，凈電荷為0；另一個(gè)（含His，Glu，Val）可生成DNP-His，在pH=6.4時(shí)帶正電荷。當(dāng)多肽用胰凝乳蛋白酶降解時(shí)，也得到兩個(gè)肽段，其中一個(gè)（Asp，Ala，Tyr）在pH=6.4時(shí)呈中性，另一個(gè)（Lys，His，Glu，Val）在pH=6.4 帶正電荷。此多肽的氨基酸序列如何？

參考答案：Asn-Ala-Tyr-Glu-Lys-His-Gln-Val

3.問答題將含有Asp、Gly、Thr， Leu和Lys的pH=3.0的緩沖溶液，加到預(yù)先用同樣緩沖溶液平衡過的Dowex -50陽(yáng)離子交換樹脂中，然后用該緩沖溶液洗脫，這5種氨基酸洗脫的順序如何？并說明原因。

參考答案：陽(yáng)離子交換樹脂分離氨基酸的原理是，各種氨基酸在pH=3.0時(shí)帶正電荷多少不同，帶正電荷越多，在樹胎

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4.問答題一種蛋白質(zhì)在用1mmol.L+二硫蘇糖醇（一種含有二硫鍵的糖）處理后，它的SDS凝膠電泳譜帶相對(duì)位置由原來的0.67減小為0.64，試解釋原因。

參考答案：硫蘇糖醇與肽鏈中的Cys巰基發(fā)生反應(yīng)，經(jīng)二硫鍵結(jié)合到肽鏈上，蛋白質(zhì)分子量增大，電泳速度降低，所以它的SDS凝膠電泳譜帶相...

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5.問答題環(huán)亞乙基亞胺能夠與蛋白質(zhì)的Cys殘基作用，生成（S）-乙基氨基衍生物。經(jīng)修飾后，Cys的羧基所形成的肽鍵能夠被胰蛋白酶水解，試解釋原因。

參考答案：因?yàn)橐鹊鞍酌改苓x擇性地水解Lys的羧基所形成的肽鍵，Lys的R基為- -（CH₂）₄

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