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問(wèn)答題
【簡(jiǎn)答題】Vmax與米氏常數(shù)可以通過(guò)作圖法求得,試比較v-[S]圖,雙倒數(shù)圖,v-v/[S]作圖,[S]/v-[S]作圖及直接線性作圖法求Vmax和Km的優(yōu)缺點(diǎn)?
答案:
(1)v-[S]圖是直角雙曲線,可以通過(guò)其漸近線求Vmax,v=1/2Vmax時(shí)對(duì)應(yīng)的[S]為Km;優(yōu)點(diǎn)是比較直觀,缺點(diǎn)...
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問(wèn)答題
【簡(jiǎn)答題】一種蛋白質(zhì)的混合物在pH6的DEAE-纖維素柱中被分離,用pH6稀鹽緩沖液可以洗脫C,用pH6的高鹽緩沖液,B和A依次被洗脫,用凝膠過(guò)濾測(cè)定得A的Mr 是240000,B的Mr是120000,C的Mr是60000。但SDS-PAGE只發(fā)現(xiàn)一條帶。請(qǐng)分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
答案:
DEAE-纖維素柱層析的結(jié)果說(shuō)明,在pH6的條件下,A帶有較多的負(fù)電荷,B次之,C帶負(fù)電荷最少。凝膠過(guò)濾法測(cè)出A的Mr是...
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問(wèn)答題
【簡(jiǎn)答題】凝膠過(guò)濾和SDS-PAGE 均是利用凝膠,按照分子大小分離蛋白質(zhì)的,為什么凝膠過(guò)濾時(shí),蛋白質(zhì)分子越小,洗脫速度越慢,而在SDS-PAGE中,蛋白質(zhì)分子越小,遷移速度越快?
答案:
凝膠過(guò)濾時(shí),凝膠顆粒排阻Mr較大的蛋白質(zhì),僅允許Mr較小的蛋白質(zhì)進(jìn)入顆粒內(nèi)部,所以Mr較大的蛋白質(zhì)只能在凝膠顆粒之間的空...
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